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人Flag標簽ELISA試劑盒,(Flag-tag)酶免檢測

更新時間:2019-03-29      瀏覽次數:1949

人Flag標簽ELISA試劑盒,(Flag-tag)酶免檢測

人Flag標簽(Flag-tag)ELISA試劑盒僅供科研使用

 

實驗原理:                                     

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包人Flag標簽Flag-tag)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人Flag標簽Flag-tag)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


試劑盒組成:

 

 

 

 

試劑盒操作步驟:

 

 

 

 

實驗所需自備試驗器材:

1. 酶標儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

實驗結果計算:

 

繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

 

 

 

試劑盒性能:

1. 檢測范圍:0.625 ng/ml - 20 ng/ml

2. 靈敏度:低檢測濃度小于0.1 ng/ml

3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。

 

技術小提示:

1. 當混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。

2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結果的準確性。

4. 混合后的顯色底物在上板前應為無色,請避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍色。

 

5. 終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內顏色由藍變黃;若孔內有綠色,則表明孔內液體未混勻;請充分混合。

 

產品有效期:6個月

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