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人骨粘連蛋白ELISA試劑盒實驗操作步驟

更新時間:2020-06-15      瀏覽次數:745

人骨粘連蛋白ELISA試劑盒實驗操作步驟

Elisa試劑盒 性能:

 1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

 2.靈敏度:低檢測濃度小于10 pg/ml。

 3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

 4.重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

 有效期:6個月

 

 

樣本處理及要求

1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

 

 

樣本收集保存

  1、血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

  2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

  3、細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

  4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

  5、保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

 

 

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