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果糖-1,6-二磷酸(FDP)測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

更新時(shí)間:2021-04-16      瀏覽次數(shù):1274

果糖-1,6-二磷酸(FDP)測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

 

產(chǎn)品說明: 果糖 1,6-二磷酸(fructose-1,6-diphosphate, FDP)是糖酵解過程中的一種重要的中間產(chǎn)物,對(duì)多種酶具有調(diào)節(jié) 作用,具有改善細(xì)胞能量代謝、增加能量利用、抗心律失常及抗組織過氧化等作用,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥。

醛縮酶催化果糖 1,6-二磷酸裂解,產(chǎn)物與 2,4-二硝基苯肼在酸性介質(zhì)中反應(yīng)生成 2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液 中呈紅棕色,在 540 nm 處有特征吸收峰

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、低溫臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰 和蒸餾水、EP管。


樣本處理 1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液一)加入提取 液一,冰浴勻漿后于4℃,12000g離心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g離心10min 后取上清待測(cè)。 2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):提取液一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液 一)加入提取液一,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);于4℃,12000g 離心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g離心10min后取上清待測(cè)。 3. 血清(漿):取100μL血清(漿)加入1mL提取液一,4℃,12000g離心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g離心10min后取上清待測(cè)。

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