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原裝進(jìn)口elisa試劑盒的一些使用問題解析

更新時(shí)間:2022-08-24      瀏覽次數(shù):817
  原裝進(jìn)口elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠游離脂肪酸(FFA)水平。用純化的小鼠游離脂肪酸(FFA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入游離脂肪酸(FFA),再與HRP標(biāo)記的游離脂肪酸(FFA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成醉終的黃色。顏色的深淺和樣品中的游離脂肪酸(FFA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠游離脂肪酸(FFA)濃度。
  原裝進(jìn)口elisa試劑盒的問題解析:
  1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。
  2、加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理
  3、洗板時(shí)容易造成誤差:因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)
  4、顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況
  5、終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒
  6、讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈
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