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超敏版人白細(xì)胞介素18(IL-18)ELISA檢測試劑盒原理

更新時(shí)間:2022-09-07      瀏覽次數(shù):1081

超敏版人白細(xì)胞介素18(IL-18)ELISA檢測試劑盒原理

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實(shí)驗(yàn)室一角:

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所需要的儀器耗材:

1. 96孔讀板儀器。 

2. 自動(dòng)洗板機(jī). 

3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。 

4. Eppendorf 管。 


操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。




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