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ELISA試劑盒該怎么選擇,掌握這五個(gè)步驟

更新時(shí)間:2020-08-20      瀏覽次數(shù):1905
  ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用,然而實(shí)驗(yàn)新手們面對各種各樣、動則上上千種的ELISA試劑盒,內(nèi)心應(yīng)該是崩潰的。
  首先,你要明確研究種屬:
  一般來說,廠家都會在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬,且為單詞,檢索種屬的常用語言為英文。
  如果您需對不同物種的同一因子進(jìn)行定量,建議優(yōu)先尋找適用于多個(gè)種屬的 ELISA 試劑盒。
  其次,要明確樣本類型:
  不同廠家驗(yàn)證樣本類型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗(yàn)證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本,根據(jù)樣本處理方式的差異,分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,因此購買前需仔細(xì)核對。
  第三步:要會預(yù)測自己的目標(biāo)因子的濃度
  一般來說,待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6,正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL,病人會顯著增高,CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。
  因而,必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。
  若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測動態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。
  如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒,各類型檢測范圍差異較大,需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。
  第四步:檢查試劑盒進(jìn)行過哪些質(zhì)控
  質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)在說明書中即可找到,在購買前檢查試劑盒是否進(jìn)行過嚴(yán)格的質(zhì)控實(shí)驗(yàn),包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗(yàn)、線性稀釋實(shí)驗(yàn)及交叉反應(yīng)測試等,每個(gè)數(shù)據(jù)好都看一下,確保*的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。
  第五步:確定需檢測的因子數(shù)量
  如果待測因子超過 5 個(gè),且樣本量較小時(shí),單因子 ELISA 檢測方法并不是選擇。
  建議考慮多因子檢測方法,如固相芯片(樣本數(shù)量一般 5 個(gè)以內(nèi),檢測指標(biāo)可達(dá)上百個(gè))及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達(dá) 80 個(gè),檢測指標(biāo)多達(dá) 50 個(gè))或微流控 ELISA 檢測系統(tǒng) Ella。
  可節(jié)約樣本及時(shí)間成本,也可保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確。
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